放射自顯影的原理是利用放射性同位素所發(fā)射出來的帶電離子(α或β粒子)作用于感光材料的鹵化銀晶體,從而產(chǎn)生潛影,這種潛影可用顯影液顯示,成為可見的"像",因此,它是利用鹵化銀乳膠顯像檢查和測量放射性的一種方法。
其原理是將放射性同位素(如14C和3H)標記的化合物導入生物體內(nèi),經(jīng)過一段時間后,將標本制成切片或涂片,涂上鹵化銀乳膠,經(jīng)一定時間的放射性曝光,組織中的放射性即可使乳膠感光。然后經(jīng)過顯影、定影處理顯示還原的黑色銀顆粒,即可得知標本中標記物的準確位置和數(shù)量,放射自顯影的切片還可再用染料染色,這樣便可在顯微鏡下對標記上放射性的化合物進行定位或相對定量測定。這種技術(shù)與電鏡樣品處理,則為電鏡放射自顯影。由于有機大分子均含有碳、氫原子,故實驗室一般常選用14C和3H標記。14C和3H均為弱放射性同位素,半衰期長,14C為5730年,3H為12.5年。一般常用3H胸腺嘧啶脫氧核苷(3H-TDR)來顯示DNA,用3H尿嘧啶核苷(3H-UDR)顯示RNA;用3H氨基酸研究蛋白質(zhì),研究多糖則用3H甘露糖、3H巖藻糖等。
放射自顯影分類
1.大體放射自顯影
研究放射性物質(zhì)在整個生物體內(nèi)或者生物體一個部分的分布,用x光片或者普通感光片做感光材料,結(jié)果用肉眼觀察。
2.光鏡放射自顯影
研究放射性物質(zhì)在各種組織和細胞內(nèi)的分布情況,用核子乳膠做感光材料,結(jié)果用光鏡觀察。
3.電鏡放射自顯影
研究放射性物質(zhì)在細胞超微結(jié)構(gòu)上的分布,用細顆粒核子乳膠做感光材料,結(jié)果用電鏡觀察。