全自動核酸純化儀是提純核酸的專用儀器,對于廣大的生物科研人員來說,養(yǎng)細(xì)胞、養(yǎng)細(xì)菌、提核酸等都是實(shí)驗(yàn)室的常見操作,實(shí)驗(yàn)操作費(fèi)時費(fèi)力,過程中可能還會遇到各種坑。
核酸分為脫氧核糖核酸DNA、和核糖核酸RNA、,它是由許多核苷酸單體聚合成的生物大分子化合物,為生命的最基本物質(zhì)之一。核酸的提取分別為DNA提取和RNA提取,二者的提取原理大致相同,簡單來說分為細(xì)胞或者組織的裂解和核酸純化兩大步驟。
核酸提取純化方法常用的有酚/氯仿抽提法、離心柱法、全自動核酸純化儀磁珠法等。
離心柱純化
這里以DNA提取離心柱為例。離心柱結(jié)構(gòu)主要是特殊硅基質(zhì)吸附材料,能特異性吸附DNA,而RNA與蛋白質(zhì)則會穿過。該方法能選擇性地吸附核酸而不吸附蛋白質(zhì)及鹽,從而實(shí)現(xiàn)核酸與蛋白質(zhì)及鹽的分離,是目前試劑盒提取廣泛使用的方法。
該方法受人為操作因素影響小,提取DNA的純度穩(wěn)定性很高;而且離心柱法提取DNA的純度比傳統(tǒng)酚氯lü、仿法提取的要高。離心柱法其低廉的價格和相對便捷的操作,漸逐取代了傳統(tǒng)DNA提取方法,被高??蒲兴仁袌銎毡榻邮?。
該方法的缺點(diǎn)是需要較多的樣本,對于稀少樣本則不適合采用此方法。當(dāng)樣品過量時,需要反復(fù)進(jìn)行離心,對樣品的提取效率較低,不便于高通量、自動化操作。與現(xiàn)代生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的高通量、自動化要求格格不入,特別是在基因診斷、疾病檢測、轉(zhuǎn)基因檢測等領(lǐng)域,離心柱法DNA提取需要大量的操作人員及儀器設(shè)備。
與其它集中方法相比,全自動核酸純化儀使用的磁珠法具有不能比的優(yōu)勢,包括:
1、提取靈敏度高,只需微量的樣本就可以完成對核酸的提取;
2、純化的純度高,磁珠與核酸的特異性結(jié)合能使核酸充分與雜質(zhì)分離,使得提取的核酸純度高、濃度大;